人巨噬細(xì)胞來(lái)源趨化因子(MDC) ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)小疑問：

1) 不同批次的試劑盒，里面的試劑可以混合用么？答：本公司所銷售的試劑盒，批次不同，不可以混用，如果是同一批次的可以用，不能用第，一次的標(biāo)曲計(jì)算第二次實(shí)驗(yàn)結(jié)果。回歸模型選著：上海軒澤康生物提供的說(shuō)明書內(nèi)會(huì)有一個(gè)示意圖，一切都是以實(shí)際做出來(lái)的為準(zhǔn)，有線性回歸，也有曲線回歸，還有直線回歸。回歸方式根據(jù)您做的實(shí)際結(jié)果計(jì)算，有四參數(shù)，二項(xiàng)式。

2)問：組織樣本怎么處理？一定要用PBS勻漿么？答：1.組織勻漿液：a. 將組織樣本用PBS (0.01M, PH 7.4) 沖洗，洗去組織表面殘留的血液或雜質(zhì)。b.將組織塊稱重，記錄后剪碎，碎塊應(yīng)盡量小，便于勻漿得更充分。c. 將組織按一定的比例加入預(yù)冷的PBS(臨用加入蛋白酶抑制劑)勻漿，勻漿時(shí)置于冰上或冰浴中。(通常按組織重量：PBS體積=1:9的比例勻漿，例如1g的組織樣本對(duì)應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，檢測(cè)后計(jì)算樣品濃度時(shí)應(yīng)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù))。d.吸取勻漿液到離心管，4℃ 5000×g 離心5~10min，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反復(fù)凍融。2.不用PBS勻漿也可以的，可以選擇用生理鹽水。生理鹽水沒有特定的要求。

3) 問：實(shí)驗(yàn)過程中，標(biāo)曲做不出來(lái)是什么原因呀？樣本變化沒有很大的差異？答：根據(jù)我們的實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)預(yù)計(jì)您標(biāo)曲的順序不對(duì)，樣本的值倒是沒啥問題。建議您嚴(yán)格按照說(shuō)明書復(fù)測(cè)一遍標(biāo)曲，或者把樣本和試劑盒寄到我們實(shí)驗(yàn)室代測(cè)。做完后顯色照片拍一下，如果肉眼可見梯度的話，不排除設(shè)備濾光片的原因引起讀數(shù)混亂。

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