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蛋白質組學在微生物研究中的應用

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發布時間: 2023-12-20 08:56
最后更新: 2023-12-20 08:56
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細菌、放線菌和真菌等微生物在我們的星球上無處不在,它們廣泛分布在土壤、水、人體等環境中。微生物及其活動對生物地球化學循環和所有生物系統都具有重要意義。在微生物的研究中有許多出色的成果:1. 地球化學循環研究;2. 幫助臨床醫生確定某種疾病或疾病發展的階段;3. 確定可用于抗微生物藥物開發的毒力因子;4. 使研究人員能夠評估土壤、水和其他環境的污染狀況;5. 幫助研究人員增加牲畜和作物產量。

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微生物研究領域

微生物研究中的蛋白質組學

蛋白質組學Z_U_I初被定義為一種功能基因組學方法,它可以研究生物體內的蛋白質表達模式,并構建生物體在一定條件下所表達的所有蛋白質的蛋白質圖譜。目前,它不僅用于獲取蛋白質,提供微生物群落中蛋白質結構和活性的重要信息,還通過定量蛋白質組學用于比較兩種不同生態系統中的蛋白質含量,或者補充或糾正基因組數據。蛋白質組學方法相比于基因組學有許多優勢:由于蛋白質比RNAs(尤其是那些來自原核生物的)更穩定,蛋白質組的含量應該更少受到提取過程的影響,可以更好地了解在原位表達的生物功能。

環境蛋白質組學:通過蛋白質分類、比較和半定量蛋白質組學、蛋白質定位分析、翻譯后修飾的發現來研究不同環境(如土壤、海洋和淡水、沉積物等)中微生物群落的結構和功能。

臨床蛋白質組學:可以識別與微生物活性相關的蛋白質,有助于發現細菌感染和抗菌治療過程中的微生物生理變化和宿主-病原體相互作用,并為臨床管理提供診斷和治療支持。

藥物蛋白質組學:可用于靶點識別和驗證,從容易獲得的生物體液中識別療效和毒性生物標志物,研究藥物作用或毒性機制,識別主要影響藥物開發過程的蛋白質-蛋白質相互作用。

作物蛋白質組學:通常使用多種方法進行蛋白質組學分析,包括蛋白質/肽分離和鑒定,但也可以提供翻譯后修飾的定量和表征,以研究作物與微生物的相互作用,從而提高作物產量和農業可持續性。

蛋白質組學如何在微生物研究中發揮作用?

研究復雜微生物群落中蛋白質的結構、分布和相互作用的蛋白質組學流程如下:

1-. 樣品采集和蛋白質提取:可采集不同環境中的微生物樣品,在處理不同種類的樣品時開發特定的樣品采集和蛋白質提取方法。

2. 蛋白質分離:蛋白質可以在鑒定前分離,以便分離非常復雜的蛋白質混合物并分別分析每個蛋白質部分。分離方法有SDS-PAGE、2D-PAGE、LC和CE。靶蛋白被胰蛋白酶或其他酶消化成肽段。

3. 蛋白質定量:蛋白質的鑒定和定量有不同的方法,包括相對定量法和J_U_E|D_U_I定量法。

4. 生物信息學分析:包括蛋白質質量評價、蛋白質統計分析、蛋白水平功能注釋和網絡分析等。

蛋白質定量方法,隨著技術革命,微生物蛋白質組學目前已經發展出一系列分析方法,特別是在蛋白質定量方面。蛋白質定量包括相對定量和J_U_E|D_U_I定量:

相對定量:相對定量的方法包括基于標記的相對定量方法和無標記的相對定量方法:

基于標記的相對定量方法:通常用于比較兩個樣品中蛋白質的相對水平,依賴于將化學或代謝標簽摻入到蛋白質或肽中,包括iTRAQ、TMT、ICAT和SILAC等方法。


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